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IA-2抗體檢測試劑盒的基本工作原理如下

更新時間:2025-10-23點擊次數:44
  IA-2抗體檢測試劑盒主要用于輔助診斷1型糖尿病等自身免疫性疾病,基本工作原理如下:
 
  1.樣本采集與準備:從患者體內采集血清樣本。這些樣本中可能含有待檢測的抗中性粒細胞胞漿抗體。
 
  2.抗原固定:將中性粒細胞或其提取物作為抗原,固定在載玻片上。當中性粒細胞受抗原刺激后,胞漿中的α-顆粒釋放蛋白酶-3、髓過氧化物酶等物質,這些物質可成為引發機體產生免疫應答的目標抗原。
 
  3.間接免疫熒光反應:把處理好的患者血清樣本滴加到涂有抗原的載玻片區域。如果血清中存在抗中性粒細胞胞漿抗體,就會與相應的抗原結合。隨后加入帶有熒光標記的二抗,它會識別并結合已與抗原相連的抗體(即患者體內的ANCA),形成“抗原 -抗體 -熒光標記物”復合物。
 
  4.觀察結果:使用熒光顯微鏡觀察載玻片。若出現特異性熒光信號,則表明樣品中含有抗中性粒細胞胞漿抗體;反之則無。通過這種方式可以定性地判斷是否存在該類抗體。
 
  IA-2抗體檢測試劑盒的測定步驟:
 
  -采集要求:使用無菌管收集患者血清或血漿(優先推薦血清),避免溶血、脂血或渾濁樣本。若無法立即檢測,需分離后于2~8℃冷藏保存,并在規定時間內完成測試。
 
  -預處理:無需特殊處理,直接取上清液作為待測樣本;部分試劑盒可能要求稀釋至特定倍數(按說明書操作)。
 
  -提前取出所有組分(微孔板、酶結合物、底物溶液等),室溫平衡30分鐘以上,確保溫度一致。
 
  -嚴格按比例配制洗滌液(如PBS+Tween-20)、顯色劑等工作液,充分混勻并標記用途。
 
  -標準品/質控設置:每塊板均需包含系列濃度的標準品及陰/陽性對照,用于繪制標準曲線和驗證實驗有效性。
 
  -樣本加載:向對應孔中依次加入待測樣本、稀釋后的對照品各50μL(具體體積以試劑盒為準)。
 
  -溫育:封板膜覆蓋后置于37℃恒溫箱中反應60分鐘,期間避免震動。
 
  -棄去孔內液體,用洗板機或手工加滿洗滌液靜置30秒后甩干,重復此過程至少3次,確保去除未結合成分。洗滌后需拍干殘留液體。
IA-2抗體檢測試劑盒

TEL:22-83726755

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