視神經(jīng)脊髓炎譜系疾?。∟MOSD）是一種主要累及青壯年人群，復(fù)發(fā)率和致殘率*的中樞神經(jīng)系統(tǒng)炎性脫髓鞘疾病。2019年9月27日NMPA批準(zhǔn)了水通道蛋白（AQP4）抗體檢測(cè)試劑盒（酶聯(lián)免疫法）的上市，用于體外定量測(cè)定人血清中水通道蛋白抗體（AQP4 Ab）的含量。該試劑盒（RSR, AQP4 Ab Version 2）來(lái)自天津阿斯?fàn)柹锟萍加邢薰?，注?cè)號(hào)：國(guó)械注進(jìn)20192400461。

2021年12月中國(guó)免疫學(xué)會(huì)神經(jīng)免疫分會(huì)組織國(guó)內(nèi)專(zhuān)家重磅發(fā)布了2021版《中國(guó)視神經(jīng)脊髓炎譜系疾病診斷與治療指南》（以下簡(jiǎn)稱(chēng)《指南》），在實(shí)驗(yàn)室診斷方面，較前版有較大的補(bǔ)充，重申了AQP4-IgG在診斷中的重要性。AQP4-IgG是具有高度特異性的診斷標(biāo)志物，特異度高達(dá)90%，敏感度約為70%。

指南中所推薦的CBA和流式細(xì)胞術(shù)大多數(shù)為實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法，高度依賴(lài)檢測(cè)人員的操作水平（細(xì)胞轉(zhuǎn)染水平，不同轉(zhuǎn)染技術(shù)的選取，檢測(cè)結(jié)果判讀等）。

2021版《指南》較2016年版明確了抗體定量檢測(cè)的意義，并充分肯定了ELISA法獲得的定量結(jié)果對(duì)制定臨床診療方案的輔助意義。

我們查閱了指南的征引文獻(xiàn)【53-55】，進(jìn)一步分析文章的數(shù)據(jù)和結(jié)論來(lái)源。

靈敏度： 三例文獻(xiàn)中ELISA法的靈敏度最高，優(yōu)于間接免疫熒光(IIF)法、免疫組化(IHC)法和基于細(xì)胞的檢測(cè)(CBA)法。

特異性：綜合特異性排名：IIF=ELISA=CBA≥IHC

●   NMOSD疾病組（108例）：

66例視神經(jīng)脊髓炎（NMO），25例長(zhǎng)節(jié)段橫貫性脊髓炎（LETM），14例復(fù)發(fā)性視神經(jīng)炎（ON），3例非長(zhǎng)節(jié)段橫貫脊髓炎/視神經(jīng)炎（NETM/ON）

●   對(duì)照組（153例）：

109例多發(fā)性硬化（MS），39例其他神經(jīng)系統(tǒng)疾?。∣ND）, 5例健康對(duì)照(HC)

●   ELISA法

RSR, AQP4 Ab Version 1

現(xiàn)款2代試劑盒全面優(yōu)于文中1代性能

檢測(cè)全部樣本（261例）

●   免疫組化法

檢測(cè)部分樣本（207例）

1. 靈敏度：

ELISA法靈敏度高。ELISA法靈敏度在下列疾病亞組（單發(fā)或多發(fā)癥狀患者）中均高于IHC法：50/66例(75.8%)NMO患者，17/25例(68%)LETM患者，3/14例(21.4%)ON患者，2/3例(66.7%)ON合并非廣泛性橫斷脊髓炎患者。在針對(duì)性更強(qiáng)的NMOSD患者中，同時(shí)接受雙方法學(xué)檢測(cè)的結(jié)果中ELISA法仍維持更高的陽(yáng)性率（10例ELISA檢測(cè)單陽(yáng)性，3例IHC檢測(cè)單陽(yáng)性）。

2. 特異性：

數(shù)據(jù)證實(shí)ELISA法特異性高于IHC法：在對(duì)照組中，151/153例(98.7%)患者呈AQP4抗體陰性（ELISA法），116/118例（98.3%）患者呈AQP4抗體陰性（IHC法）。

3. 重復(fù)性：

ELISA在AQP4抗體檢測(cè)方面上具有很好的批內(nèi)和批間重復(fù)性。

4. 定量意義：

血清中AQP4抗體濃度與疾病活躍程度相關(guān)(p＜0.00001)。

注：m =男性；f =女性；pLR =陽(yáng)性似然比；nLR =陰性似然比；n.d.=不確定；n.a.=不適用

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● NMOSD疾病組（54例）：

9例NMO，32例視神經(jīng)炎（ON），13例橫貫性脊髓炎（TM）

● 疾病對(duì)照組（70例）：

10例MS（包括兩例視神經(jīng)脊髓OSMS），60例OND

●   組織間接免疫熒光法(IIF-tissue)

小鼠小腦組織

●   CBA法(IIF-AQP4)

轉(zhuǎn)染人AQP4的HEK293細(xì)胞 (EUROIMMUN, Germany)

●   ELISA法

商用檢測(cè)試劑盒（DLD diagnostika GmbH, Germany）

1. 靈敏性：

ELISA法優(yōu)于IIF-tissue法和CBA法。

ELISA法在NMOSD疾病組（11/54，20.4%）中和NMO疾病亞組（5/9，55.6%）中陽(yáng)性檢出率最高。

2. 特異性：

在疾病對(duì)照組中，三種方法的抗體陰性檢出例數(shù)僅相差一例，總體特異性相差不大（IIF-tissue法為68/70，97.1%；CBA法與ELISA法特異性一樣，為67/70，95.7%）。

表2 三種方法在不同疾病組患者中AQP4抗體的血清陽(yáng)性率

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●   NMOSD疾病組（54例）：

24例NMO，24例LETM，13例ON，3例脊髓炎（Myelitis）

●   對(duì)照組（27例）：

17例MS，10例健康供血者（HS）

●   ELISA法

RSR, AQP4 Ab Version 2

全自動(dòng)檢測(cè)系統(tǒng)（SkyLAB 752）

●   組織間接免疫熒光法（IIF-tissue）

基于靈長(zhǎng)類(lèi)組織

1. 方法學(xué)間一致性強(qiáng)：

ELISA檢測(cè)結(jié)果與參照方法IIF-tissue法的一致性達(dá)*。

2. 臨床準(zhǔn)確度：

NMO患者中檢測(cè)AQP4抗體的靈敏度為83.3%，特異性為*。

3. 定量意義：

NMO患者的AQP4抗體中位數(shù)濃度高于LETM患者（p=0.00006）或其他NMOSD患者及對(duì)照組(p < 0.0001)。

4. 文章結(jié)論：

新款ELISA試劑盒在全自動(dòng)化的系統(tǒng)上體現(xiàn)出較高的靈敏度和*特異性，精密度高（CV值?。?，可以提供客觀的定量結(jié)果。

表3 患者和對(duì)照組的人口統(tǒng)計(jì)學(xué)、臨床和血清學(xué)特征

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