1. 患者分組：

T1D組：納入100例瑞典T1D的患者，其中，93例患者在確診當(dāng)天進(jìn)行了血樣采集，3例患者在診斷后一天內(nèi)進(jìn)行了采樣，4例患者的T1D病程時間未知。在該研究組中，50例患者為15歲以下兒童(中位年齡8.8歲;范圍2.3 - 14.7;男/女: 27/23=1.17)，50例為青少年和成人(中位年齡16.5歲;范圍15.1 -41;男/女: 32/18 = 1.78)。

健康對照組：納入200名健康對照，包括100名兒童和100名成人。對照組兒童的中位年齡為12.6歲，范圍為11.9-13.6，男/女: 50/50=1.00；成人中位年齡42.5歲，范圍21 - 65，男/女：59/41=1.44。

2. 檢測方法

RBAs、ICA-IF和ELISA的結(jié)果匯總見表1和表2。3 Screen的靈敏度為93%，特異度為97.5%；2 Screen的靈敏度為91%，特異度為98.5%。93例初篩陽性患者中，多數(shù)為多種自身抗體陽性，其中72%(67/93)同時為GADA和IA-2A陽性，57%(53/93)為三種自身抗體(GADA、IA-2A和ZnT8A)陽性。在T1D篩查陰性的7例中，僅有1例呈GADA ELISA單項(xiàng)檢測陽性。

在健康對照中，僅有1例(0.5%)存在多種自身抗體(IA-2A和ZnT8A)陽性。

在13例T1D患者和2名健康對照中IAA呈陽性。

表1 100例1型糖尿病患者的胰島β細(xì)胞特異性自身抗體結(jié)果

IA-2A RBA的靈敏度為78%。GADA RBA的加入提高了12%靈敏度，將該方法學(xué)整體靈敏度提高至90%，而ZnT8A RBA (R/W/Q中的任何一種)的加入使靈敏度進(jìn)一步提高到 91%。相比之下，添加IAA和ICA-IF結(jié)果并沒有比使用其他檢測方法獲得更高的靈敏度(表1)。

2 Screen和3 Screen兩種檢測方法最一致(Kappa=0.97)。IA-2A RBA和IA-2A ELISA兩種檢測方法的一致性最好(Kappa=0.96)。

研究者采用了6種RBA、1種IF和5種ELISA對100名T1D患者和200名健康對照的胰島β細(xì)胞特異性自身抗體進(jìn)行了檢測，結(jié)果發(fā)現(xiàn)3 Screen方法表現(xiàn)優(yōu)異，其靈敏度(93%)和特異性(97.5%)最高。2 Screen和3 Screen的檢測靈敏度優(yōu)于任何RBA。

相比于放免法，GADA ELISA擁有更高的檢出率(84% vs 77% GADA RBA)，大多數(shù)(76%)患者在兩種GADA檢測方法中均呈陽性，而8例患者僅通過ELISA檢測為GADA陽性，1例僅通過GADA RBA檢測為GADA陽性。

相比于放免法(61%)，ZnT8A ELISA (ZnT8R和ZnT8W變體)可在更多(75%)T1D患者中檢測出陽性。IA-2A ELISA和RBA鑒定出相同數(shù)量(78%)的陽性患者。

3 Screen適用于人群篩查。除免疫項(xiàng)目常用的血清樣本外，經(jīng)Ca2+處理的EDTA血漿也可以得到可靠的結(jié)果[24,25]。在樣品中加入血紅蛋白、生物素、脂肪乳劑或膽紅素對結(jié)果沒有顯著影響，這表明該檢測不容易受到這些物質(zhì)的干擾。

綜上所述，本研究顯示了3 Screen優(yōu)異的性能，具有較高的檢測靈敏度和特異性，可用于健康人群中對三種自身抗體（GADA、IA-2A和ZnT8A）的初步篩查。在3 Screen篩查陽性的情況下，需進(jìn)一步對抗體進(jìn)行單項(xiàng)檢測，以識別具有進(jìn)展為T1D高風(fēng)險的多重自身抗體陽性患者。經(jīng)3 Screen篩查試驗(yàn)陰性的樣本通常不需要進(jìn)一步檢測。此外，對兩歲以下兒童進(jìn)行IAA檢測也是有必要的。因此，3 Screen + IAA的測試策略更適合非常年幼的兒童。